- 产品品牌:沃特世
- 产品型号:2695
沃特世2695高效液相色谱仪检测
苏州禾川化工新材料科技有限公司(简称:禾川技术),为企业,科研的生产研发提供专业化解决方案。禾川技术以苏州大学为产学研基地,融合了中科院有机所、应化所、浙江大学、南京大学、苏州大学、华东理工大学等多家科研机构与高校的外围专家博士团队,依托生物纳米科技园、苏州大学、中科院纳米所强大的仪器测试平台,凭借强大的科研实力,多年丰富的研发经验,共同建立化工材料分析中心,新材料研发中心。禾川技术致力于化工行业材料检测、材料分析、配方还原、新领域新材料的开发;推进新项目整体研发进度,缩短研发周期,推动化工产业自主研发的进程。禾川技术依托生物纳米科技园、苏州大学、中科院纳米所强大的仪器测试平台,该平台拥有国内外先进的大型光谱仪器,可以有效地对化工材料进行定性、定量分析,结构表征、性能测试。正是这些先进仪器的硬件保障为禾川技术的各项服务能够优质、高效、完成奠定基础。高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、工业、医学、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
禾川技术实验室采用waters 2695高效液相:流动相(水,甲烷,乙腈)固定相(十八烷基硅烷化键合相),广泛应用于分子生物学、分子药理学、分子细胞学以及生物心理学、生物化学、生理学和病理学等学科,材料或试剂的定性定量检测。一高效液相色谱法原理高效液相色谱以经典的液相色谱为基础,是以高压下的液体为流动相的色谱过程。通常所说的柱层析、薄层层析或纸层析就是经典的液相色谱。所用的固定相为大于100um 的吸附剂( 硅胶、氧化铝等)。这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大,传质扩散慢,因而柱效低,分离能力差,只能进行简单混合物的分离。而高效液相所用的固定相粒度小(5um-10um)、传质快、柱效高。高效液相色谱法(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来的一种分析方法。在保健食品功效成分、维生素类、营养强化剂、蛋白质的分离测定等应用广泛。世界上约有80%的有机化合物可以用HPLC来分析测定。1.1高效液相色谱分析的流程用泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统,然后输出,经流量与压力测量之后,导入进样器。被测物由进样器注入,并随流动相通过色谱柱,在柱上进行分离后进入检测器,检测信号由数据处理设备采集与处理,并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分离(极性范围比较宽)还可用梯度控制器作梯度洗脱。这和气相色谱的程序升温类似,不同的是气相色谱改变温度,而HPLC改变的是流动相极性,使样品各组分在最佳条件下得以分离。1.2高效液相色谱的分离过程同其他色谱过程一样,HPLC也是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换过程。它借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。开始样品加在柱头上,假设样品中含有3个组分,A、B和C,随流动相一起进入色谱柱,开始在固定相和流动相之间进行分配。分配系数小的组分A不易被固定相阻留,较早地流出色谱柱。分配系数大的组分C 在固定相上滞留时间长,较晚流出色谱柱。组分B的分配系数介于A,C之间,第二个流出色谱柱。若一个含有多个组分的混合物进入系统,则混合物中各组分按其在两相间分配系数的不同先后流出色谱柱,达到分离目的。不同组分在色谱过程中的分离情况,首先取决于各组分在两相间的分配系数、吸附能力、亲和力,吸附能力等是否有差异,这是热力学平衡问题,也是分离的首要条件。另外,当不同组分在色谱柱中运动时,谱带随柱长展宽,分离情况与两相之间的扩散系数、柱的填充情况,固定相粒度的大小、以及流动相的流速等有关。从而分离最终效果则是热力学与动力学两方面的综合效益。1.3高效液相色谱的类型1)吸附色谱在吸附色谱中,样品的极性官能团牢固地保留在填料的吸附活性中心上,非极性烃基几乎不予保留。因此想要清楚地辨别极性功能团的数量,种类和位置。样品能用吸附色谱分离的应是能溶解于有机溶剂并是非离子型的,强离子样品是不适宜的。吸附色谱所使用的流动相以水、二氯甲烷,三氯甲烷为基础,按照样品的极性加上乙醇,然而,最好是使所加入醇的浓度为10%或更少一些。可进一步减小百分数。因为高浓度的醇会减少填料的吸附活性,减弱吸附能力,并使重现困难。2)分配色谱i)正相分配色谱正相分配色谱适用于不溶于水而溶于有机溶剂且带有极性基团的样品,但正相分配色谱不适合于离子型物质。ii)反相分配色谱这种方法目前应用非常广泛,应用的范围也很广,在反相分配色谱中,样品的非极性部分起保留作用。
通过使用的流动相是水—甲醇和水—乙腈,通过加入甲醇或乙腈的量的不同来调节分离,但如果样品带有离子型基团,需要在流动相中加入盐或调节流动相的PH值,例如,如果样品有一个—COOH 基团,使流动相的PH值是偏向酸性的,由于抑制了—COOH基团的电离而加强了保留。这个方法叫离子抑止法,如果样品有强离子基,有时候采用在流动相中加入适当抗衡离子以形成离子对的离子对法。在调节PH值中,保持PH值在填料说明书手册中所规定的范围内,大多数化学键式的二氧化硅使用在PH=2-9,然而,当加入盐以后,最好使其PH=7.5-8或更小的,多孔聚合物填料能应用非常广泛的PH值。二HPLC参数介绍1.型号:Alliance H Waters2695液相色谱仪2.相关参数:1)速精度:≤0.075%RSD 、412)梯度精度:≤0.15%RSD 3)流速准度:±1% 4)系统滞后体积:<650UL,(包括自动进样器),不随反压变化 三HPLC应用领域 1.微克: 生物技术领域的酶的分离、生物学和生化学测试2.克级: 对照品(分析标准)毒物学分析所需组份:高纯品中的主要成份、副产品的分离提取3.千克级: 工业规模生产,活性成份,药物4.毫克: 结构描述和特征鉴定,包括:生产中的副产品、生物矩阵的新 陈代谢产物、天然产物
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