- 产品品牌:赛智科技
- 产品型号:LC-10T液相色谱仪
广西苦丁茶嫩叶和老叶中槲皮素和山柰素的含量测定HPLC 应用范围: 本方法适用于广西苦丁茶嫩叶和老叶中槲皮素和山柰素含量的测定 方法原理: 本品剪碎加甲醇或70 %乙醇或水回流提取,经液相色谱分离,在360 nm处测定峰面积,外标法计算含量 仪器设备及实验条件: 仪器 Waters液相色谱仪(Waters600泵,7725 i六通阀,996二极管阵列检测器,Millennium32 数据处理系统) 色谱条件 色谱柱:Waters公司N0va—Pak C18柱(3. 9 mm×300 mm,4μm) ;流动相:甲醇—0. 4 %磷酸溶液(50∶50);流速:0. 7 mL/min;检测波长:360 nm;柱温:40 ℃; 试样制备: 对照品溶液制备 精密称取槲皮素对照品8. 12 mg和山柰素对照品8. 34 mg分别置50 mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度再稀释2. 5倍,即得对照品溶液。 供试品溶液制备 (1)用甲醇提取 将苦丁茶嫩叶和老叶分别剪碎后,称取样品20 g,加甲醇200 mL,水浴回流1. 5 h,过滤,残渣再加甲醇100 mL,回流1 h,合并滤液,用甲醇定容至250 mL量瓶中,得苦丁茶甲醇提取液。(2)用乙醇提取 称取已剪碎的苦丁茶叶20 g,加体积分数为70 %乙醇200 mL,水浴回流1. 5 h,过滤,残渣再加体积分数为70 %乙醇100 mL,回流1 h;合并滤液,用体积分数为70 %乙醇定容至250 mL量瓶中,得苦丁茶乙醇提取液。(3)用水提取 称取已剪碎的苦丁茶叶20 g,加200 mL的水煮提取1. 5 h,过滤,残渣再加水100 mL煮1 h;合并滤液浓缩至50 mL,再加体积分数为95 %乙醇140 mL搅匀使沉淀,静置24 h,抽滤,滤渣用体积分数为80 %乙醇洗涤,滤液合并置于250 mL量瓶中,用体积分数为80 %乙醇定容至刻度,摇匀,即得苦丁茶水提取液。 仪器设备及实验条件:
液相配置: | STI2000高效液相色谱仪、STI500液相色谱仪 |
输液泵 | P2000高压恒流输液泵、P501经济型恒流输液泵 |
检测器 | UV2000紫外检测器、UV501紫外检测器 |
软件 | N2000色谱工作站、Clarify四通道USB版色谱工作站(符合药典GLP认证)、VI2010色谱工作站(符合药典GLP认证) |
进样阀 | 8725i手动进样阀(美国原装进口,同比7725i手动进样)、VI-11手动进样阀、7725i手动进样阀 |
色谱柱 | VertexC18(4.6mm ×150mm),美国原装进口宽PH范围,更适合药物开发研究 |
备注: | 以上配置提供推荐参考http://syltech.b2b.hc360.com |
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