供应高效液相色谱仪器

LC98-II型高效液相色谱仪在原料乳与乳制品三聚氰胺检测中的应用

北京温分分析仪器技术开发有限公司孙高祥

内蒙古旺旺工厂丁小伟

新疆石河子旺旺乳制品厂靳妩媚

1前言

依据GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法，本文提供了LC98-II型高效液相色谱仪（HPLC）对原料乳及乳制品中三聚氰胺的高效液相色谱（HPLC）检测方法。

2范围

GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法中，提出高效液相色谱法的定量限为2 mg/kg，液相色谱-质谱/质谱法的定量限为0.01 mg/kg。而本文所提供的LC98-II型高效液相色谱仪（HPLC）对原料乳与乳制品中三聚氰胺的定量检测限可达0.05mg/kg。

3高效液相色谱法

3.1原理

试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用高效液相色谱测定，外标法定量。

3.2试剂与材料

均按GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法的3.2操作。

3.3仪器和设备

3.3.1LC98-II型高效液相色谱仪（北京温分分析仪器技术开发有限公司）：配有P98-II型高压输液泵及UV98-II型紫外检测器。

3.3.2分析天平：感量为0.0001 g和0.01 g。

3.3.3离心机：转速不低于4000 r/min。

3.3.4超声波水浴。

3.3.5固相萃取装置。

3.3.6氮气吹干仪。

3.3.7涡旋混合器。

3.3.8具塞塑料离心管：50 mL。

3.3.9研钵。

3.4样品处理

均按GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法的3.4操作。

3.5高效液相色谱测定

3.5.1HPLC参考条件

a)色谱柱：C8柱，250 mm×4.6 mm，5 μm，或C18柱，250 mm×4.6 mm，5 μm。

b)流动相：C8柱，离子对试剂缓冲液（3.2.10）-乙腈（85+15，体积比），混匀。C18柱，离子对试剂缓冲液（3.2.10）-乙腈（90+10，体积比），混匀。

c)流速：1.0 mL/min。

d)柱温：40℃。

e)波长：240 nm。

f)进样量：20 μL。

3.5.2标准曲线的绘制

用流动相将三聚氰胺(CAS No:108781)标准储备液逐级稀释得到的浓度为0.1、0.8、2、20、40、80 μg/mL的标准工作液，浓度由低到高进样检测，以峰面积-浓度作图，得到图A所示标准曲线。

图A标准曲线

3.5.3定量测定

待测样(旺旺集团提供)液中三聚氰胺的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样分析。下图所示浓度为0.1mg/kg三聚氰胺待测样色谱图及数据。

3.5.4结果计算

试样中三聚氰胺的含量由色谱数据处理软件或按式（1）计算获得：

A × c × V×1000

X= × f ……………………（1）

As × m×1000

式中：

X——试样中三聚氰胺的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；

A——样液中三聚氰胺的峰面积；

c——标准溶液中三聚氰胺的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；

V——样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；

As ——标准溶液中三聚氰胺的峰面积；

m——试样的质量，单位为克（g）；

f——稀释倍数。

3.6空白实验

除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。

3.7仪器定量检测限

LC98-II型高效液相色谱仪（HPLC）的噪声指标为5X10-5AU/mV(50µV)，按式（1）计算，可得LC98-II型高效液相色谱仪（HPLC）对原料乳与乳制品中三聚氰胺的定量检测限可达0.05mg/kg。

3.8回收率

在添加浓度2 mg/kg～10 mg/kg浓度范围内，回收率在80%～110%之间，相对标准偏差小于10%。

3.9允许差

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

3.10结论

本文所提供的LC98-II型高效液相色谱仪（HPLC）对原料乳与乳制品中三聚氰胺的定量检测限可达0.05mg/kg。远远优于GB/T 22388—2008规定的2mg/kg定量检测限，为GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法中规定的定量限的1/40。

北京温分分析仪器技术开发有限公司

销售部地址：北京市海淀区丰慧中路七号新材料创业大厦304

邮编：100094电话：010-58711498-802传真：010-58711499

联系人:黄翼手机: 13522965708

Email:huangyiwms@163.comhttp://www.bwaic.com

生产基地地址：北京市海淀区西小营温阳路西121号邮编：100095

二、甲方按产品出厂标准提供乙方，产品保修期为贰年，终身维护。厂家每年度举办的技术培训班（已成功举办了七届），为用户提供两人免学费培训。仪器卖出一年内,用户随时可到厂家免费培训。